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蛋白质SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳

         聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理是聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚
丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能
够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。 而SD
S-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。作用:用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。
                                          
      SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋
白分子的二、三级结构。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和
SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差
异和结构差异。
   SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,与连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率。浓缩胶的作用是有
堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一
个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离
子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离
子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导
区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动
界面附近,浓缩成一中间层。此鉴定方法中,蛋白质的迁移率主要取决于它的相对分子质量,而与所带电荷和分
子形状无关。 
 
此研究应用领域:
1、定量蛋白组研究,最多能鉴定2000多个蛋白,且实现样品间精确定量
2、疾病标志物研究,疾病间、正常和疾病间差异蛋白的精确定量更有利于疾病标志物的寻找和验证。(疾病
包括各种肿瘤、心血管疾病等目前重大的疾病)
3、动物、植物等各种经济价值指标的筛选、机理研究
4、药物治疗和开发
5、其他各种后蛋白组学
 

      北京中昊时代生物技术中心与北京大学签约合作,凭借多年分子生物学实践经验及稳定的技术操作,拥有
国内最专业的世界水平的蛋白组学技术实验室,并且在临床应用方面与多家高等院校、科研院所和医药公司建
立了稳定的合作关系!

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详情请咨询科研服务专线:010-59871930-807 Hotline:400-888-0207
 
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