AlbuSorb™ 白蛋白去除试剂盒 | 高效去除血清白蛋白 (>90%)
AlbuSorb™ 白蛋白去除试剂盒
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导读 血清与血浆中,白蛋白(Albumin)占总蛋白质量的50–60%,是蛋白质组学分析中最大的干扰物。它如同“乌云”一般,在LC-MS、凝胶电泳和免疫检测中掩盖了众多低丰度信号,严重阻碍了生物标志物发现与疾病机制研究。 AlbuSorb™ 提供了一种高效、温和、非免疫亲和的白蛋白去除方案。它采用独特的弹性聚电解质微珠技术,能结合样本中 >90% 的白蛋白(去除能力达30 mg/mL),同时几乎不与其他功能性蛋白发生交叉反应。处理后的样本(流经液)完整保留了原有的酶活性和生物活性,可直接用于下游的Western blot、LC-MS、ELISA等分析。 |
产品概述
AlbuSorb™ 是一款专为血清或血浆样本设计的高效白蛋白去除试剂盒。
它创新性地采用固相弹性聚电解质微珠技术,通过聚合物成分、交联结构与电荷特性的协同作用来实现对白蛋白的高选择性结合。与传统方法相比,AlbuSorb™ 不基于蓝色染料亲和层析或免疫亲和层析,因此避免了这些方法常见的样本干扰、配体泄露和操作繁琐等问题。
该试剂盒以干粉形式提供,操作流程简便:只需将预处理的微珠与稀释后的血清样本混合孵育,经简单离心,即可在上清液中收获去除白蛋白后的高价值样本。
产品特性亮点
» 高效去除:白蛋白去除率 >90%,每毫升试剂可结合高达30 mg的白蛋白。
» 高特异性:达到亲和层析级别的去除效果,与其他蛋白几乎无交叉反应。
» 一次性使用:无需色谱柱再生,杜绝批次间差异和交叉污染风险。
» 条件温和:温和的结合与洗脱条件最大程度保护蛋白质三级结构与天然活性。
» 广谱适用:已验证适用于人、绵羊、牛、小鼠、山羊、大鼠、小牛等多种物种。
» 结果可靠:流经液(未结合部分)保留原有的酶活性和生物活性,下游分析数据更真实。
» 灵活兼容:已验证可用于自动化兼容的高通量XTR吸头(tip)体系。
产品规格
注意:试剂盒内已包含所需数量的离心过滤管。额外耗材(低蛋白结合,0.45 µm滤膜)需单独购买。
技术原理
聚电解质是带有重复固定电荷单元的聚合物。AlbuSorb™ 所用的微珠属于一类固相弹性聚电解质材料,其结合蛋白的能力源于一种经实证推导的化学设计,该设计综合了聚合物组成、交联架构和电荷特性。
如同DNA和肝素等生物聚合物一样,决定其反应活性的关键在于柔性聚合物链上静电基团的空间排布。这种设计赋予AlbuSorb™对白蛋白的高选择性和结合容量。
AlbuSorb™ 工作原理流程图
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样本准备:将血清样本用结合缓冲液稀释,加入到含有AlbuSorb™微珠的离心过滤管中。
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混合孵育:振荡混匀,使微珠与白蛋白充分结合。
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离心分离:高速离心,结合了白蛋白的微珠被截留在滤膜上方。
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收集流穿液:滤过液即为去除白蛋白后的样本,富含低丰度蛋白和功能性分子,可直接用于下游分析。

典型性能参数
| 性能指标 | AlbuSorb™ | ||
|---|---|---|---|
| 血清样本体积 | 25 µL | ||
| 白蛋白去除率 | >90% | ||
| 回收蛋白质量 | 500-600 µg(白蛋白去除后) | ||
| LC-MS/MS鉴定独特蛋白数(单次3小时梯度) | 350-400 |
应用方向
AlbuSorb™ 的白蛋白去除能力使其成为蛋白质组学、生物标志物研究和临床样本分析的理想前处理工具。其温和的特性也保证了处理后样本在功能研究中的有效性。
» 关键应用领域
蛋白质组学(LC-MS/MS):有效降低白蛋白对质谱信号的抑制和干扰,显著提高低丰度蛋白的鉴定数目。在单次3小时梯度的LC-MS/MS分析中,处理后的样本可鉴定出350-400种独特蛋白。
生物标志物发现:去除高丰度白蛋白的“掩盖效应”,暴露疾病相关低丰度生物标志物,提升发现效率。
凝胶电泳(1D & 2D):显著改善SDS-PAGE及双向电泳的分辨率,使低丰度蛋白条带更清晰可见。
免疫检测(Western Blot, ELISA):减少白蛋白引起的非特异性结合,降低背景噪音,提高检测的特异性和灵敏度。
功能与活性研究:由于流穿液保留了酶和生物分子的活性,适用于后续的酶活性测定和细胞功能实验。
已验证样本类型与应用文献
| 样本类型 | 研究领域 | 下游分析 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 大鼠血清 | 癌症 | MALDI | |||
| 大鼠血清 | 糖尿病 | Western Blot | |||
| 人滑液 | 类风湿性关节炎 | 2DE | |||
| 人尿液外泌体 | 糖尿病 | LC-MS/MS SRM |
操作流程
以下方案适用于25 µL血清样本的处理
准备:建议上样前先使用0.45 µm针头式滤器过滤样本,去除胶体状不溶物。
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称量微珠:称取 50 mg AlbuSorb™ 微珠,置于试剂盒提供的离心过滤管中。
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预平衡(清洗):加入 400 µL 结合缓冲液BB1,手动或涡旋振荡3分钟。然后以 1,000 g 离心2分钟,弃去滤液。重复此步骤一次。
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结合:向装有微珠的过滤管中加入 250 µL 结合缓冲液BB1,再准确加入 25 µL 血清样本。在旋转振荡器上混匀10分钟。
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离心收集:以 9,000 g 离心4分钟。收集滤液,此即为去除白蛋白后的血清样本(含其他血清蛋白)。
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(可选)洗脱白蛋白:如需分析结合的白蛋白,可向过滤管中加入 200 µL 洗脱缓冲液(0.2 M Tris + 0.5 M NaCl,pH 10,需自备),振荡10分钟,再以9,000 g离心4分钟,收集滤液。
方案灵活可调:该方案可等比例放大或缩小,以适应不同体积的血清样本。微珠用量也可根据白蛋白含量高低酌情增减。
高通量自动化兼容性
AlbuSorb™ 已验证可在DPX Technologies XTR吸头(tip) 形式下运行,该形式显著提升了易用性和可扩展性,支持在96孔板上利用自动化液体处理系统(如Integra、Hamilton等平台)进行多批次并行处理。AlbuSorb™ 微珠松散地容纳于XTR吸头内,通过分散式功能最大化去除效率。
如需了解XTR吸头格式的价格,请联系我们。
引用文献亮点:
外泌体研究:Chettimada, Sukrutha, et al. "Exosome markers associated with immune activation and oxidative stress in HIV patients on antiretroviral therapy." Scientific Reports 8.1 (2018): 7227.
代谢疾病研究:Valladolid-Acebes, Ismael, et al. "Lowering apolipoprotein CIII protects against high-fat diet-induced metabolic derangements." Science Advances 7.11 (2021): eabc2931. 该研究使用AlbuSorb™对小鼠血浆进行白蛋白去除,以便通过Western blot准确定量载脂蛋白CIII(apoCIII)水平。
脑脊液蛋白质组学:Gwenael Pottiez, Pawel Ciborowski. "Proteomic Profiling of Cerebrospinal Fluid." Expression Profiling In Neuroscience Neuromethods. 2012;64:245-270.
滑液研究:Happonen KE, Fürst CM, Saxne T et al. "PRELP protein inhibits the formation of the complement membrane attack complex." Journal of Biological Chemistry. 2012;287(11):8092-100.
用户反馈:“AlbuSorb™ 对我们非常有效。我们从10% FBS条件培养基样本中去除了至少90%的白蛋白。”—— Joseph Sucic, 密歇根大学。
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